15% SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒
产品简介：
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25T |
50T |
保存条件 |
| 15% SDS-PAGE分离胶预混液 |
200mL |
200mL×2 |
4℃，避光 |
| 5% SDS-PAGE浓缩胶预混液 |
100mL |
100mL |
4℃，避光 |
| PAGE胶凝固剂 |
1g |
2g |
干粉 4℃；溶液 -20℃ |
| PAGE胶促凝剂 |
0.8mL |
1.5mL |
4℃，避光 |
操作步骤(仅供参考)：
1、10%PAGE 胶凝固剂配置方法，取0.1g PAGE 胶凝固剂加入1mL 蒸馏水，待其完全溶解，即为10%PAGE胶凝固剂。
2、在15% SDS-PAGE 分离胶预混液，按照1%的比例加入相应量的10%过硫酸铵或其替代物溶液，按照0.01%的比例加入相应量的TEMED。例如10ml 15% SDS-PAGE 下层胶预混液中，加入100μl 10%过硫酸铵或其替代物溶液和10μl TEMED 或其替代物溶液。适当混匀后倒入到制胶模具中，用异丙醇或蒸馏水封住液面，直至下层胶凝固充分。
3、去除分离胶上面覆盖的液体，尽量去干净，然后倒入添加了10%PAGE 胶凝固剂溶液和PAGE 胶促凝剂的5%SDS-PAGE 上层胶预混液，插入梳子，待上层胶凝固后，则表明制胶步骤结束，可以准备进行后续的电泳了。通常30-60 分钟内胶会凝固。具体的凝固时间和温度及光照有关。（参考下表）
| 成分 |
配制不同体积分离胶预混液所需各成分的体积 ( mL) |
| 15%SDS-PAGE分离胶预混液 |
5 |
10 |
15 |
20 |
30 |
50 |
| 10%PAGE胶凝固剂 |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.3 |
0.5 |
| PAGE胶促凝剂 |
0.005 |
0.01 |
0.015 |
0.02 |
0.03 |
0.05 |
| 成分 |
配制不同体积浓缩胶预混液所需各成分的体积 ( mL) |
| 5%SDS-PAGE浓缩胶预混液 |
2 |
5 |
10 |
20 |
30 |
50 |
| 10%PAGE胶凝固剂 |
0.02 |
0.05 |
0.1 |
0.2 |
0.3 |
0.5 |
| PAGE胶促凝剂 |
0.002 |
0.005 |
0.01 |
0.02 |
0.03 |
0.05 |
注意事项：
1、在冬天室温较低时，可以自行再额外添加少量TEMED 以促进凝胶凝固；也可将胶放37℃温箱凝固。
2、SDS-PAGE 分离胶预混液中含有SDS，若低温放置出现沉淀，可使溶液恢复室温后，待沉淀溶解后再使用。
3、PAGE 胶促凝剂和10%PAGE 胶凝固剂最后加，在加入前需混匀前面所加试剂。10%PAGE 胶凝固确定剂溶液在4℃有效期为一周；PAGE 胶促凝剂易挥发，使用后请盖紧瓶盖。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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