正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
S-CAT是土壤微生物代谢的重要酶类，在H2O2清除系统中具有重要作用。
测定原理：
H2O2在240nm下有特征吸收峰，通过测定与土壤反应后溶液在此波长下吸光度的变化，即可反应S-CAT活性的高低。
试剂组成和配制：
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产品名称
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50T/24S
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Storage
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试剂一：液体
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100μl×5
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4℃
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试剂二：粉剂
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1瓶
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4℃
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试剂三：液体
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6ml
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4℃
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说明书
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一份
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试剂一：液体100μl×5瓶，4℃保存；临用前每瓶加入9.9ml蒸馏水充分溶解后待用；用不完的试剂4℃保存；
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入2ml蒸馏水充分溶解待用，用不完的试剂4℃保存（如出现结晶析出，60℃-90℃水浴溶解后使用）。
自备仪器和用品：
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1ml石英比色皿和蒸馏水。
样品处理：
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干，过30~50目筛。
测定步骤：
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试剂名称
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测定管
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无基质管
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无土管
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风干土样（g）
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0.1
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0.1
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试剂一（μl）
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1000
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1000
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蒸馏水（μl）
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1000
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25℃振荡培养 20min
混匀8000g，25℃离心5min，取820μl上清
混匀，用蒸馏水调零，240nm处记录各管A值。
注意事项:
每个测定管要设一个无基质管，无土管只要做一管。
S-CAT活性计算：
单位的定义：每天每g风干土样催化1μmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。
计算公式：S-CAT（μmol/d/g）＝[(A无土管-A测定管+A无基质管)×V反总÷（ε×d）×106]÷W÷T=18.9×（A无土管-A测定管+A无基质管）
V反总：反应体系总体积，1.145×10-3 L；ε：过氧化氢摩尔消光系数，4.36×104 L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm； T：反应时间，20 min=1/72d； W：样本质量，0.1g。 |
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