中文名称 |
Trypsin 1:250/胰蛋白酶1:250 |
英文名称 |
Trypsin(bovine pancreas) |
CAS号 |
9002-07-7 |
分子量 |
23300~23800 |
溶解性 |
10mg/mL, H2O |
外观(性状) |
由牛胰提取而得的一种肽链内切酶,白色粉末。溶于水,不溶于乙醇、甘油、氯仿和乙醚。等电点pI 10.5。最适pH值7.8~8.5左右,pH值2~3是稳定的,pH值5以上易自溶失活,pH>9.0不可逆失活。Ca2+对酶活性有稳定作用;重金属离子、有机磷化合物、DFP、天然胰蛋白酶抑制剂对其活性有强烈抑制 |
产品介绍: |
效价:1:250
活力:≥250 USP u/mg(等于1000 BAEE u/mg)1克可以酶解250G蛋白
干燥失重:≤4.8%
用途:本品仅供科研,不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)专一性催化水解赖氨酸、精氨酸羧基形成的肽键,可用于蛋白质化学研究。
胰蛋白酶(Trypsin)的“1:250”配比通常是指其 活性单位与质量的比例,即 1克胰蛋白酶对应250单位的酶活性。这种标注常见于实验室或工业生产中,用于指导胰蛋白酶溶液的配制和活性控制。
以下是详细的配比方法及说明:
胰蛋白酶(1:250)的配制方法
一 . 基础配方(以配制100 mL溶液为例
胰蛋白酶粉末:1 g(活性单位250 U/mg,即总活性250,000 U)
溶剂:无菌PBS缓冲液(磷酸盐缓冲液,pH 7.4)或Hanks平衡盐溶液(HBSS)。
辅助试剂(可选):
- EDTA(乙二胺四乙酸,0.02%-0.05%):用于螯合二价金属离子,增强胰蛋白酶活性。 酚红指示剂:便于观察pH变化。
二. 配制步骤
1. 称量胰蛋白酶:
准确称取1 g胰蛋白酶粉末(需确保粉末活性单位为250 U/mg)。
2. 溶解:
将胰蛋白酶粉末缓慢加入约80 mL预冷的无菌PBS缓冲液(4℃)中,磁力搅拌至完全溶解。加入EDTA(终浓度0.02%)或其他辅助试剂(根据实验需求)。
3.定容:用PBS缓冲液定容至100 mL,轻轻混匀。
4. 过滤除菌:用0.22 μm滤膜过滤溶液,分装至无菌离心管中。
5. 保存:-20℃冻存,避免反复冻融(分装为小份更佳)。
二、关键说明
1. 活性单位(U)的定义,1单位(U)胰蛋白酶活性:在25℃、pH 8.0条件下,1分钟内水解1 μmol的苯甲酰-L-精氨酸乙酯(BAEE)所需的酶量。
1:250的含义:1 g胰蛋白酶粉末的总活性为250,000 U(即250 U/mg)。
2. 注意事项:
无菌操作:配制全程需在超净台或生物安全柜中进行,避免微生物污染。
温度控制:
溶解时用4℃预冷缓冲液,防止酶变性。解冻使用前需37℃水浴预热,但避免长时间高温放置。
避免自溶:胰蛋白酶在溶液中会自我降解,建议现用现配或分装冻存。
EDTA的作用:螯合Ca²⁺、Mg²⁺等离子,增强胰蛋白酶对细胞间连接的消化能力。
3. 应用场:
细胞消化:常用于贴壁细胞的消化分离
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博奥拓达源头厂家,规格齐全。从标准到特殊,博奥拓达定制服务,满足您的个性化需求!
注意:
1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2.为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
备注:
以上数据均来自公开文献,博奥拓达暂未进行独立验证,仅供参考。
These protocols are for reference only. Biotopped does not independently validate these methods.
问:配成0.25%的胰酶溶液PH能到多少?
答:PH到5-6左右。