试剂盒成分：
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名称
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4×20ml
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4×50ml
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Storage
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试剂(A): ORO Fixative
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20ml
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50 ml
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RT 避光
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试剂(B): ORO Stain
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B1: ORO Stain A
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12 ml
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30 ml
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4℃ 避光
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B2: ORO Stain B
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8 ml
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20ml
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RT
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按B1:B2=3:2比例混合静置10min, 即为ORO Stain，不宜提前配制；配好后，若有沉淀， 过滤之后再使用。
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试剂(C): Mayer苏木素染色液
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20ml
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50ml
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4℃ 避光
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试剂(D): ORO Buffer
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20ml
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50ml
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RT
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产品说明：
脂质(Lipid)是中性脂肪、类脂及其衍生物的总称，其共同的物理特性是不溶于水，易溶于有机 溶剂(如乙醇、乙醚等)。人体的脂肪主要有两种：1、储存脂肪，如中性脂肪，主要分布于皮下、肾、胰腺等部位。2、结构脂肪，如类脂(磷脂、糖脂、胆固醇等)，主要分布于细胞内。中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油组成的脂类，呈中性。中性脂肪是储存能量的方式之一，在氧化时释放出能量。中性脂肪染色经常采用苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ、苏丹黑B、油红O法等。传统方法采用苏丹染料，最近发现偶氮染料油红O更适合脂肪的染色。油红O是很强的脂溶剂和染脂剂， 较易与甘油三脂结合呈小脂滴状，与磷脂结合力稍差，其染色原理一般认为是物理上的溶液作用或吸附作用，借溶液作用使脂肪染色。染料在细胞内脂质的溶解度较原溶剂中的溶解度更大，所以在染色时染料就从有机溶剂转移入脂质而使脂肪染色。
油红O染色液(细胞专用)简称ORO染色液，可显示最小的脂滴，可优先为脂类从溶剂中吸附染料。标本不采用含有乙醇的固定液，如需要固定可采用10%福尔马林)。脂肪阳性染色结果呈橘黄至红色，但具体颜色因脂质浓度而定。
自备材料：
60%异丙醇、蒸馏水
操作步骤（仅供参考）：
1、 制备新鲜骨髓、血液涂片，入ORO Fixative固定10～15min。
2、 取出涂片，放于流通的空气中10～15min。
3、 入新配制好的ORO Stain，浸染15min。
4、 入60%异丙醇漂洗20～30s，流水冲洗，入蒸馏水稍微清洗。
5、 入Mayer苏木素染色液，复染核2min。
6、 入ORO Buffer 1min。
染色结果:
中性脂肪 橙红色或橘红色
磷脂 粉红色
细胞核 蓝色
注意事项：
1、 ORO染色液不够稳定，易产生沉淀，不宜提前配制。
2、 Mayer 苏木素染色液复染时间不能过长。
3、 染色结果不能长期保存，应尽快观察及照相。 |
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