碘化丙啶PI染色液(50ug/ml,含RNase及破膜剂)非无菌

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中文名称	碘化丙啶PI染色液(50ug/ml,含RNase及破膜剂)非无菌
产品介绍：	产品简介：碘化丙啶染色(PI stain)可以对细胞周期与细胞凋亡进行分析｡碘化丙啶(Propidiumlodide，PI是一种可以嵌合到双链DNA和RNA的碱基对中并与之结合的荧光染料，无碱基特异性｡碘化丙啶与双链DNA结合后可以产生荧光，并且荧光强度和双链DNA的含量成正比｡细胞内的DNA被Propidium lodide染色后，可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含星测定｡碘化丙啶 PI 染色液(50μg/ml,含 RNase)主要由 PI、破膜剂、RNase 等组成，经常用于培养的贴壁或悬浮细胞的细胞周期与细胞凋亡检测，亦可用于区分细胞凋亡和细胞坏死。PI 染色液工作浓度为 20～50μg/ml，推荐用于 DNA 染色，细胞检测含量范围一般为 0.1～1×10⁶ 之间｡操作步骤(仅供参考)： 1、细胞样品的制备： ⑴贴壁细胞： ① 小心收集细胞培养液到一个无菌离心管内备用。 ② 用胰蛋白酶消化细胞至可以被轻轻用移液管或枪头吹打下来时，加入前面收集的细胞培养液，吹打下所有的贴壁细胞，并轻轻吹散细胞。 ③ 收集上述细胞悬液到离心管内。 ④ 4℃，1000g 离心 3～5min，使细胞沉到管底。小心吸取上清并丢弃，可留大约 50μl培养液，以免吸走细胞。 ⑤ 加入约 1ml 提前预冷的 PBS，重悬细胞，并转移至 1.5ml 无菌离心管。 ⑥ 4℃，1000g 离心 3～5min，使细胞沉到管底。 ⑦ 小心吸取上清并丢弃，可留大约 50μl PBS，以免吸走细胞。 ⑧ 轻轻弹击离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团。 ⑵悬浮细胞： ① 4℃，1000g 离心 3～5min，使细胞沉到管底。 ② 小心吸取上清并丢弃，可留大约 50μl 培养液，以免吸走细胞。 ③ 加入约 1ml 提前预冷的 PBS，重悬细胞，并转移至 1.5ml 无菌离心管。 ④ 4℃，1000g 离心 3～5min，使细胞沉到管底。 ⑤ 小心吸取上清并丢弃，可留大约 50μl PBS，以免吸走细胞。 ⑥ 轻轻弹击离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团。 2、细胞的固定：加入 1ml 冰浴预冷 70%乙醇中，轻轻吹打混匀，4℃条件下固定 2h 或更长时间。4℃固定 12～24h 可能效果更佳。 3、细胞的清洗： ① 4℃，1000g 离心 3～5min，使细胞沉到管底。 ② 小心吸取上清并丢弃，可留大约 50μl 溶液，以免吸走细胞。 ③ 加入约 1ml 提前预冷的 PBS，重悬细胞，并转移至 1.5ml 无菌离心管。 ④ 4℃，1000g 离心 3～5min，使细胞沉到管底。 ⑤ 小心吸取上清并丢弃，可留大约 50μl PBS，以免吸走细胞。 ⑥ 轻轻弹击离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团。 4、PI 染色：在每个待检细胞样品中加入 500μl 配制好的 PI 染色工作液，轻轻重悬细胞沉淀，置于 37℃避光水浴 30min。 5、检测与分析：用流式细胞仪在激发波长 488nm 波长处检测红色荧光，同时检测光散射情况。采用适当分析｡染色结果：凋亡细胞 G1 峰左侧出现亚二倍体细胞群的峰型，在光散射谱上，前向光散射低于正常，侧向光散射高于正常｡注意事项： 1、荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽快检测。 2、为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。 3、在为了获得细胞沉淀的离心的过程中，对于特殊细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当提高离心力或延长离心时间。 4、如果用于组织的细胞周期与细胞凋亡检测，则必须把组织消化后，制备成单细胞悬液，才可以进行检测。 5、细胞凋亡时，凋亡细胞的标志之一是 DNA 可染行降低，但这种情况并是绝对的，DNA含量的降低或者 DNA 与染料结合能力下降也会导致 DNA 可染行降低，在分析的时候应特别注意。 6、PI 对人体有一定刺激性，请注意适当防护。 7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作｡

中文名称

碘化丙啶PI染色液(50ug/ml,含RNase及破膜剂)非无菌

产品介绍：

产品简介：
碘化丙啶染色(PI stain)可以对细胞周期与细胞凋亡进行分析｡碘化丙啶(Propidiumlodide，PI是一种可以嵌合到双链DNA和RNA的碱基对中并与之结合的荧光染料，无碱基特异性｡碘化丙啶与双链DNA结合后可以产生荧光，并且荧光强度和双链DNA的含量成正比｡细胞内的DNA被Propidium lodide染色后，可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含星测定｡
碘化丙啶 PI 染色液(50μg/ml,含 RNase)主要由 PI、破膜剂、RNase 等组成，经常用于培养的贴壁或悬浮细胞的细胞周期与细胞凋亡检测，亦可用于区分细胞凋亡和细胞坏死。PI 染色液工作浓度为 20～50μg/ml，推荐用于 DNA 染色，细胞检测含量范围一般为 0.1～1×10⁶ 之间｡
操作步骤(仅供参考)：
1、细胞样品的制备：
⑴贴壁细胞：
① 小心收集细胞培养液到一个无菌离心管内备用。
② 用胰蛋白酶消化细胞至可以被轻轻用移液管或枪头吹打下来时，加入前面收集的细胞培养液，吹打下所有的贴壁细胞，并轻轻吹散细胞。
③ 收集上述细胞悬液到离心管内。
④ 4℃，1000g 离心 3～5min，使细胞沉到管底。小心吸取上清并丢弃，可留大约 50μl培养液，以免吸走细胞。
⑤ 加入约 1ml 提前预冷的 PBS，重悬细胞，并转移至 1.5ml 无菌离心管。
⑥ 4℃，1000g 离心 3～5min，使细胞沉到管底。
⑦ 小心吸取上清并丢弃，可留大约 50μl PBS，以免吸走细胞。
⑧ 轻轻弹击离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团。
⑵悬浮细胞：
① 4℃，1000g 离心 3～5min，使细胞沉到管底。
② 小心吸取上清并丢弃，可留大约 50μl 培养液，以免吸走细胞。
③ 加入约 1ml 提前预冷的 PBS，重悬细胞，并转移至 1.5ml 无菌离心管。
④ 4℃，1000g 离心 3～5min，使细胞沉到管底。
⑤ 小心吸取上清并丢弃，可留大约 50μl PBS，以免吸走细胞。
⑥ 轻轻弹击离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团。
2、细胞的固定：加入 1ml 冰浴预冷 70%乙醇中，轻轻吹打混匀，4℃条件下固定 2h 或更长时间。4℃固定 12～24h 可能效果更佳。
3、细胞的清洗：
① 4℃，1000g 离心 3～5min，使细胞沉到管底。
② 小心吸取上清并丢弃，可留大约 50μl 溶液，以免吸走细胞。
③ 加入约 1ml 提前预冷的 PBS，重悬细胞，并转移至 1.5ml 无菌离心管。
④ 4℃，1000g 离心 3～5min，使细胞沉到管底。
⑤ 小心吸取上清并丢弃，可留大约 50μl PBS，以免吸走细胞。
⑥ 轻轻弹击离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团。
4、PI 染色：在每个待检细胞样品中加入 500μl 配制好的 PI 染色工作液，轻轻重悬细胞沉淀，置于 37℃避光水浴 30min。
5、检测与分析：用流式细胞仪在激发波长 488nm 波长处检测红色荧光，同时检测光散射情况。采用适当分析｡
染色结果：
凋亡细胞 G1 峰左侧出现亚二倍体细胞群的峰型，在光散射谱上，前向光散射低于正常，侧向光散射高于正常｡
注意事项：
1、荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽快检测。
2、为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
3、在为了获得细胞沉淀的离心的过程中，对于特殊细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当提高离心力或延长离心时间。
4、如果用于组织的细胞周期与细胞凋亡检测，则必须把组织消化后，制备成单细胞悬液，才可以进行检测。
5、细胞凋亡时，凋亡细胞的标志之一是 DNA 可染行降低，但这种情况并是绝对的，DNA含量的降低或者 DNA 与染料结合能力下降也会导致 DNA 可染行降低，在分析的时候应特别注意。
6、PI 对人体有一定刺激性，请注意适当防护。
7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作｡

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1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

2.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

备注:
以上数据均来自公开文献,博奥拓达暂未进行独立验证,仅供参考。
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