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胰蛋白酶-EDTA溶液(0.25%:0.02%,含酚红)无菌
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中文名称 胰蛋白酶-EDTA溶液(0.25%:0.02%,含酚红)无菌
产品介绍:

产品简介:
       胰蛋白酶(Trypsin)是由胰脏产生没有活性的胰蛋白酶原分泌到小肠后,小肠内的肠肽酶会活化该酶原,形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特点在于已经活化的胰蛋白酶,能够继续活化更多胰蛋白酶原,这种过程即自动催化。胰蛋白酶在小肠工作,它会将蛋白质水解为肽,进而分解为氨基酸,其最适温度约为 37℃。
       Trypsin-EDTA solution(0.25%:0.02%,含酚红)由 0.25%胰酶、0.02%EDTA(0.53mM)、少量酚红等组成,经过滤除菌。本试剂可以直接用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化,通常室温下 1min 左右就可以消化下大多数贴壁细胞。


自 备 材 料:
    1、 PBS、Hanks 液或无血清培养液
    2、 显微镜
    3、 离心机



操作步骤 (仅供参考) :
   1、贴壁细胞的消化
       ①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
       ②加入少量 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min,不同的细胞消化时间有所不同。
       ③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化              液。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
       ④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
       ⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
   2、组织的消化
       不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。


注意事项 :
   1、 尽量减少反复冻融的次数,以免失效。
   2、在 Trypsin-EDTA solution 过程中,要特别注意避免消化液被细菌污染。
   3、Trypsin-EDTA solution 消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。
   4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

定制产品:

博奥拓达源头厂家,规格齐全。从标准到特殊,博奥拓达定制服务,满足您的个性化需求!

鉴于定制产品的规格与功能是根据客户特定需求定制,其操作与维护方式亦有独特性。因此,不提供通用说明书。

 

注意:

1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

2.为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。 

 

备注:
以上数据均来自公开文献,博奥拓达暂未进行独立验证,仅供参考。
These protocols are for reference only. Biotopped does not independently validate these methods.

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