产品说明： SYBR Green I 是一种结合于dsDNA 双螺旋小沟区域的具有绿色激发光的荧光染料。SYBR Green I 与dsDNA 结合后荧光信号会增强800-1000 倍，是一种常用的qPCR 荧光染料。该染料经济实惠、使用方便，具有高灵敏度，信噪比高等优势，可应用于基因表达差异分析，基因芯片等。 使⽤说明： 1、建立如下实验体系：（仅供参考）
名称
体积
10×的无Mg2+聚合酶缓冲液
5μL
50mM MgCl2
2.5μL
2mM dNTP
5μL
20×SYBR Green
2.5μL
Taq DNA polymerase
1-5units
F, R Primers
各 0.1-0.5μM
模板 DNA
适量
dH2O
to a final volume of 50μL
注：DNA 模板的添加量通常在100 ng 以下。因不同种类的DNA 模板中含有的靶基因的拷贝数不同，必要时可进行梯度稀释，确定合适的DNA 模板添加量。cDNA 作为模板时的添加量不要超过PCR 反应液总体积的10%。 2、执行实时定量PCR 程序，采集荧光信号。
程序
温度
时间
循环
酶激活
95℃
2min
1
变性
95℃
5s
45
退火延伸
50-60℃ 72℃
5s
25s
3. 分析数据 注意事项： 1. SYBR Green I 的使用浓度是保证荧光定量PCR 实验成功的关键因素。染料浓度过低会使荧光信号变化降低，导致低拷贝的样品可能无法检出，而在高浓度时又会抑制PCR 反应。所以一般在使用SYBR Green 染料时应根据实际情况优化使用浓度，反应的终浓度为1×到0.2×之间。 2. 提高Mg2+浓度可以降低SYBR Green I 对PCR 反应的抑制作用。我们建议在用SYBR Green I 进行荧光PCR 反应时，Mg2+浓度比无SYBR Green I 的普通PCR 反应高出0.5～3mM。 3. 为了您的健康，请穿实验服并戴一次性手套进行操作。
博奥拓达源头厂家，规格齐全。从标准到特殊，博奥拓达定制服务，满足您的个性化需求！
注意：
1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
备注:
以上数据均来自公开文献,博奥拓达暂未进行独立验证,仅供参考。
These protocols are for reference only. Biotopped does not independently validate these methods.
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